建議血清*好保存在-15℃以下。若一次使用不完一瓶,建議無菌分裝于適當的**容器內冷凍備用。
我們建議將血清從冷凍箱取出后,置于2℃~8℃冰箱中解凍,然后在室溫下全融,解凍過程中必須規則地搖晃均勻。
血清中絮狀沉淀產生的原因有很多,其中*普遍的還是由于血清中脂蛋白的變性所致,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,這也是造成沉淀的主要原因,但這些絮狀沉淀并不影響血清本身的質量。欲去除沉淀,可采取自然沉降法或者將血清分裝于無菌離心管中,2000~3000rpm離心5min。一般不建議用過濾的方法去除絮狀沉淀,因為沉淀會阻塞濾膜,造成過濾困難或無法過濾。
諸多研究表明大多數細胞的培養無須進行血清的熱滅活;而在**學研究和ES細胞、昆蟲細胞、平滑肌細胞的培養過程中,推薦使用熱滅**清。實驗顯示,經正確熱滅活處理的血清,對細胞的生長只有微小的促進或完全沒有促進作用,而通常因為高溫處理影響了血清的質量,造成細胞生長速率降低。并且熱處理過的血清,沉淀物明顯增多,倒置顯微鏡下觀察呈“小黑點”,往往會使研究者誤以為是血清受到了污染,而把血清放于37℃中,沉淀物又會更增多,有會使研究者誤認為是微生物的分裂增殖。因此我們建議若非必須,可以不進行熱處理,既節省時間又確保質量。
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