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細胞培養中微生物污染的排除

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系列 目錄號 規格
一次性移液管 GSP010001 1ML,**,黃色環,1/包,500/
巴斯德吸管 PP101002 0.2ML,**,1/,5000/
一次性離心管 CFT000150 15ML,圓錐底,不**,500/ 包,500/
一次性微量離心管 CFT000005 0.5ML,不**,1000/包,8000/
一次性細胞培養板 TCP001006 6WELL,**,普通型,100/
一次性細胞培養瓶 TCF001025 25ML,**,普通型,密封蓋,10/包,200/
一次性細胞培養皿 TCD000035 3.5CM,**,普通型,10/包,960/
細胞培養轉瓶 TCB001002 2000ML,**,懸浮細胞,密封蓋,1/包,12/
培養液瓶 CTF010150 150ML,**,1/包,24/
針頭式過濾器 FMC201013 MCE膜,黃色,0.22UM,13MM,100/盒,800/
真空式過濾器 FMC201150 MCE膜,150ML,0.22UL,1/包,12/
接收瓶 FRB000150 150ML,**,1個/包,24個/箱
酶標板 FEP100096 96孔,不可拆,高結合力,10/包,200/
一次性接種環/接種針 DIL011001 1.0ul,白色,**,20/包,2000/
一次性血清板 SLP000096 96WELL,不可拆,10/包,200/
一次性血清管/樣品管 SST001015 1.5ML,可立裙邊,**,20 /包,5000/
深孔板 DMP160096 1.6ML,96孔,U型底,不**,1/包,50/
一次性細胞凍存管 FCT001005 0.5ML,50/包,5000/
比色皿 CUV010045 4.5ML,10*10*45,2*光窗,100/盒,1000/
一次性PCR管 PCR100200 0.2ML,鼓蓋,8連管,125/包,1250/
一次性**培養皿 MCD000035 3.5CM,**,10/包,960/

      細胞受各種霉菌、**和支原體污染后,一般都較難排除或殺滅,其中以支原體更難排除,因此從預防著眼為上。
      1、*****法:
      用BM-1(截耳素衍生物)和BM-2(四環素衍生物)抑制支原體
(1)***制備:均可用PBS配成250×濃縮液-20℃備用,使用濃度參考《組織培養和分子細胞學技術》117頁表6-2。
(2)處理:取受支原體污染的細胞,吸除培養液,加入含BM-1的1640培養液培養3天后,吸除培養液,再加入含BM-2的1640培養液培養4 天,如此連續三個輪回。
(3)檢測:用33258熒光染色鏡檢(每個輪回末應檢測一次)。
(4)培養:**支原體后的細胞,在不加上述***的培養液中,再傳代培養3~4次。
(5)鏡檢:如**不徹底可再進行處理至純凈為止(一般3個輪回即能被完全消除)。BM-1和BM-2與CIP(4-氟,2-羥基喹啉)聯合應用亦可,即先用含BIP培養液培養12天后,再按上述方法處理。
      2、加溫**法
      把受污染的細胞置41℃中作用5~10小時。
      3、動物體內接種**法
      把受支原體污染的腫瘤細胞接種在同種動物皮下或腹腔中,借動物**系統消滅支原體,而腫瘤細胞卻能在體內繼續生長,待一定時間后,從體內取出細胞再進行培養繁殖。
      4、巨噬細胞吞噬法
      從動物腹腔采取巨噬細胞,為排除其它細胞成分,可先進行純化,然后再加入被支原體污染的細胞培養液中混合培養。在培養過程中,為檢查支原體是否已被消除干凈,可利用支持物培養法驗證,取出支持物逐日染色、鏡檢觀察,至支原體已被消除干凈為止。

滬公網安備 31011402005168號

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